1,、DMSO對細胞存在一定的毒性,，用量受到限制，降低或者不使用DMSO,，尋找其它替代物是最好的選擇,。但是目前,，該技術領域還未發(fā)現(xiàn)凍存保護效果能與DMSO媲美的物質(zhì),，因此，聯(lián)合其它成分,，形成新的配方，降低DMSO的含量就成了較為現(xiàn)實的選擇,。
2、血清,，即使是純化得到的白蛋白,，由于其動物來源的特性，會極大增加帶來病毒等感染物質(zhì)的可能,。而且,，血清來源受限，價格昂貴,，所以其使用也必然會受到越來越多的限制,。因此，尋找替代血清的非滲透性保護劑也顯得尤為必要,。
3,、目前，最成熟和最穩(wěn)定的凍存細胞技術是將加有保護劑的細胞懸液置于-196℃液氮中,，這樣可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而保持細胞的特性,，在需要的時候經(jīng)過復蘇程序,，使得細胞重新生長增殖以用于實驗,。細胞儲存在-196℃液氮中，理論上儲存時間是無限的,，但是液氮凍存步驟繁瑣,，需要經(jīng)過程序降溫，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘,，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜）,，最后才移至液氮罐中進行長期的儲存。（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,，以防止冰晶過大,，造成細胞大量的死亡。）
1. 高安全性,，不含血清及動物源成分,，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性,。
2. 低DMSO，DMSO的含量為5%（v/v）,，極大降低了對細胞潛在的毒性作用,。
3. 細胞存活率高，無批次差異,。
4. 完全凍存液配方,，可直接使用，方便簡捷。
5. 可直接存放于-80℃冰箱凍存,，無需經(jīng)過費時的程序降溫過程（省時,、省力、省錢）,，不需要采用程序降溫儀,，更不需要放置在-196℃液氮。
6. 可原位凍存,，比如雜交瘤細胞的亞克隆,，可以大規(guī)模減少工作量，避免污染,。
凍存效果對比：
圖1. 小鼠成纖維細胞3T3細胞復蘇后細胞狀態(tài)對比圖
對照B：存活率89% 本產(chǎn)品：存活率97%
圖2. 人胚腎細胞293E細胞復蘇后細胞狀態(tài)對比圖
對照B：存活率86% 本產(chǎn)品：存活率93%
注：對照A: DMEM培養(yǎng)基+10%血清+10%DMSO,，液氮凍存；
對照B: Cellregen無血清細胞凍存液（DMSO 10% v/v）,；
本 品：無血清低DMSO細胞凍存液（DMSO 5% v/v）,。
附： 通用細胞凍存液，Cellregen無血清細胞凍存液,、無血清低DMSO細胞凍存液的比較
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通用細胞凍存液 |
Cellregen 無血清細胞凍存液 |
無血清低 DMSO 細胞凍存液 |
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主要成份 |
含血清,、含 DMSO |
不含血清，含 DMSO 10% |
不含血清,，低 DMSO 5% |
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細胞毒性 |
高 |
高 |
低 |
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安全性 |
低 動物來源病毒,、霉菌和支原體等污染的風險偏高 |
高 無動物來源病毒、霉菌和支原體等污染的風險 |
高 無動物來源病毒,、霉菌和支原體等污染的風險 |
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凍存細胞種類 |
適合含血清細胞凍存 |
通用型 適合各類細胞凍存 |
通用型 適合各類細胞凍存 |
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無血清培養(yǎng)細胞生長狀態(tài) |
易改變易由懸浮狀態(tài)回復貼壁狀態(tài) |
保持懸浮培養(yǎng)狀態(tài) |
保持懸浮培養(yǎng)狀態(tài) |
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批次差異 |
批次差異大 |
無批次差異 |
無批次差異 |
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操作方法 |
步驟繁瑣 需程序降溫凍存 |
簡單快捷 一步凍存 -80 ℃冰箱 |
簡單快捷 一步凍存 -80 ℃冰箱 |
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保存設備 |
要求高（液氮） |
要求低（ -80℃ 冰箱） |
要求低（ -80℃ 冰箱） |
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微量凍存 |
細胞易死亡,，存活率偏低 |
細胞存活率高 |
細胞存活率高 |
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原位凍存 |
不可行 |
可行，且方便快捷 如 : 雜交瘤細胞孔板凍存 |
可行,，且方便快捷 如 : 雜交瘤細胞孔板凍存 |
