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一、 新冠相關(guān)蛋白         

 

從2019年底到現(xiàn)在,，我們?nèi)粘Ｉ钊匀簧钍苄鹿诜窝椎挠绊?，主要是因?yàn)樾鹿诓《静皇怯肋h(yuǎn)一成不變的，而是會(huì)發(fā)生變異,。為便于向公眾實(shí)時(shí)更新疫情動(dòng)態(tài),，世界衛(wèi)生組織(WHO)用希臘字母重新命名了幾種主要的新冠病毒變異毒株，其中包括4種值得關(guān)注的新冠病毒突變株（VOCs）：發(fā)現(xiàn)于英國(guó)的新冠病毒突變株（編號(hào)B.1.1.7）被命名為Alpha（α）,；發(fā)現(xiàn)于南非的新冠病毒突變株（編號(hào)B.1.351 ）被命名為Beta（β）,；發(fā)現(xiàn)于巴西的新冠病毒突變株（編號(hào)為P.1）被命名為Gamma（γ）；發(fā)現(xiàn)于印度的新冠病毒突變株（編號(hào)B.1.617.2）被命名為Delta (δ),。其中， Delta新型冠狀病毒變異毒株是目前所有變異毒株中傳染能力最強(qiáng)的,，部分?jǐn)?shù)據(jù)顯示Delta變異毒株的傳染性是Alpha變異毒株的兩倍,。

 

除此之外,，Lambda（C.37）毒株也不能被忽視，首次發(fā)現(xiàn)Lambda新型冠狀病毒變異毒株是在南美國(guó)家,，最先發(fā)現(xiàn)于秘魯首都利馬,，于2021年6月被世衛(wèi)組織列為“需要留意”的變種病毒之一。 而近期在南非發(fā)現(xiàn)的新型新冠病毒變異株B.1.1.529于11月26日被世界衛(wèi)生組織列為“需要關(guān)注的變異株”,，并命名為奧密克戎（Omicron）,，該突變株擁有32處突變，有可能弱化新冠疫苗的效力,，并且更具傳染性,。

 

圖1. 冠狀病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)示意圖（來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)）

 

從上圖可以看出，冠狀病毒基因組依次編碼棘突蛋白（spike protein）,、包膜蛋白（envelope protein）,、膜蛋白（membrane protein）和核蛋白（nucleoprotein）。

 

針對(duì)全球新冠病毒主要突變株及其主要蛋白,，賽爾瑞成陸續(xù)開(kāi)發(fā)生產(chǎn)出一系列新冠蛋白,，以便為各領(lǐng)域研發(fā)人員提供應(yīng)對(duì)新冠病毒突變的解決方案。

 

核衣殼蛋白（N,，Nucleocapsid Protein）
病毒核衣殼內(nèi)最重要的蛋白之一就是核衣殼蛋白（N,，Nucleocapsid Protein），主要負(fù)責(zé)RNA的復(fù)制功能,。核衣殼蛋白（N蛋白）常作為冠狀病毒診斷檢測(cè)工具,，是免疫學(xué)快速診斷試劑的核心原料。

 

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棘突蛋白（spike protein）
棘突蛋白（spike protein）是冠狀病毒最重要的表面蛋白,，與病毒的傳染能力相關(guān),。棘突蛋白含有兩個(gè)亞基：S1和S2，其中S1主要包含受體結(jié)合區(qū)域（RBD）,，負(fù)責(zé)識(shí)別細(xì)胞受體,。S2含有膜融合過(guò)程所需的基本元件。

 

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二,、 化妝品相關(guān)蛋白         

 

重組人III型膠原蛋白
Ⅲ型膠原蛋白,，是人體皮膚、筋膜,、肌腱中主要的膠原蛋白,，與I型膠原蛋白比例為4比1。Ⅲ型膠原蛋白較細(xì)小,，存在于表皮層和真皮層之間,，稱(chēng)之為“嬰兒膠原蛋白”。微膠原層（Cushion Network）主要由Ⅲ型膠原蛋白構(gòu)成，是指位于表皮層與真皮層之間的組織結(jié)構(gòu),，是撐起表皮的關(guān)鍵,，也是肌膚塌陷的第一步。

 

重組人III型膠原蛋白是以人源III型膠原蛋白基因序列為模板,，通過(guò)基因重組技術(shù)進(jìn)行發(fā)酵表達(dá),，并經(jīng)過(guò)多種分離純化方法得到的高純度、分子量均一,、低內(nèi)毒素的類(lèi)人III型膠原蛋白,。

 

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精氨酸/賴氨酸多肽
精氨酸/賴氨酸多肽是模擬芋螺毒素勝肽，賽爾瑞成通過(guò)基因重組表達(dá)出的一種具有類(lèi)精氨酸/賴氨酸多肽肉毒素效果的多肽成分,，具有強(qiáng)效的肌肉松弛作用,，但能夠保留肌肉5%神經(jīng)肌肉電流傳導(dǎo)，不至于導(dǎo)致肌肉完全僵硬,，以達(dá)到自然的抗皺效果,。精氨酸/賴氨酸多肽用于祛皺比肉毒素安全，可控度更高,。

 

精氨酸/賴氨酸因分子量小,，具有較強(qiáng)的透皮效果，與皮膚的相容性佳,，不易過(guò)敏,，具有較好的防老、抗皺效果,。

 

賽爾瑞成制備的精氨酸/賴氨酸多肽純度>95%,內(nèi)毒素小于1 EU/μg,。

 

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重組人纖連蛋白（Fibronectin，F(xiàn)N）

重組人纖連蛋白（Recombinant human fibronectin,， Fibronectin）為一段人工重組蛋白,，由574個(gè)氨基酸組成，分子量約為63kDa,。

 

應(yīng)用：
1. 細(xì)胞培養(yǎng)：促進(jìn)細(xì)胞貼壁,、細(xì)胞黏連生長(zhǎng)增殖、維持良好細(xì)胞狀態(tài),。
2. 細(xì)胞生物學(xué)研究：促進(jìn)細(xì)胞鋪展,、遷移、運(yùn)動(dòng),；促進(jìn)細(xì) 胞生長(zhǎng),、增殖，維持細(xì)胞良好細(xì)胞狀態(tài)及功能,。
3. 美容：修復(fù)受損或老化細(xì)胞,、促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖,，產(chǎn)生膠原蛋白、彈力蛋白,，減少色沉淀,，調(diào)動(dòng)吞噬細(xì)胞清除黑色素和細(xì)胞碎片。

 

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此外,，賽爾瑞成生產(chǎn)的GMP級(jí)EGF、aFGF,、bFGF,、VEGF具有高活性、高純度,、低內(nèi)毒素的特點(diǎn),，可應(yīng)用于美容領(lǐng)域，賽爾瑞成可提供克級(jí)或千克級(jí)蛋白原料供應(yīng),。
 

三,、 蛋白A/G/L         

 

蛋白A、蛋白G和蛋白L是科學(xué)家陸續(xù)發(fā)現(xiàn)能夠與抗體進(jìn)行特異性結(jié)合的蛋白分子,。

圖2. 抗體親和層析示意圖

 

目前蛋白A及其衍生的重組蛋白,、蛋白G已廣泛應(yīng)用于抗體的純化。隨著我國(guó)抗體藥物和免疫診斷產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展,，抗體制備量將大幅提升,，市場(chǎng)對(duì)蛋白 G、蛋白 A 的需求量會(huì)迅速增加,。

 

蛋白A
蛋白A是一種來(lái)源于金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁表面蛋白,，目前，以蛋白A為親和配基的親和層析介質(zhì)已廣泛應(yīng)用于單克隆抗體和Fc重組融合蛋白的純化,。

 

由于層析柱在使用時(shí),，因樣品中變性的蛋白、脂類(lèi),、DNA等物質(zhì)常殘留在層析介質(zhì)中,，嚴(yán)重影響了層析介質(zhì)的使用壽命，常采用0.1-0.5M的氫氧化鈉進(jìn)行清洗,，而天然或普通的重組蛋白A對(duì)氫氧化鈉并不耐受,，往往導(dǎo)致蛋白A的變性和脫落。

 

賽爾瑞成通過(guò)基因重組改造,，開(kāi)發(fā)的耐堿蛋白A擁有四個(gè)IgG功能結(jié)合域,，末端帶有巰基，具有高耐堿性,、高親和力的特點(diǎn),，可作為配基制備成耐堿蛋白A親和層析介質(zhì),。

圖3. 耐堿蛋白A 經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)純度>95%

 

表1. 耐堿蛋白A親和層析介質(zhì)耐堿性能測(cè)試

 

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蛋白G   
蛋白G是一種源自鏈球菌G族的細(xì)胞壁蛋白，分子量25kDa,，為三型Fc受體,。蛋白G可以與IgG的Fc 區(qū)域特異性結(jié)合，與蛋白A相比對(duì)IgG具有更好的結(jié)合能力,，血清蛋白結(jié)合水平更低,，純度更高，配基脫落也相對(duì)更低,。天然的蛋白 G不僅與免疫球蛋白的恒定區(qū)相結(jié)合,，且與白蛋白、α2-巨球蛋白相結(jié)合,，這使得用蛋白G親和色譜提純抗體,，無(wú)法除去體系中存在的白蛋白和巨球蛋白。

 

賽爾瑞成開(kāi)發(fā)的重組蛋白G含有三個(gè)與Fc結(jié)合的結(jié)構(gòu)域,，已經(jīng)除去了與白蛋白及細(xì)胞表面結(jié)合位點(diǎn),，減少了交叉反應(yīng)和非特異性結(jié)合。

 

圖4. 蛋白G經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)純度>95%

 

表2. 蛋白G偶聯(lián)柱料抗體載量

 

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蛋白L

蛋白L是從馬格努斯消化鏈球菌分離出來(lái)的能和免疫球蛋白特異性結(jié)合的蛋白質(zhì),，分子量36 kD,。與蛋白A和蛋白G結(jié)合到（抗體）的Fc區(qū)不同的是，蛋白L能夠結(jié)合那些含有κ輕鏈的抗體,，結(jié)合位點(diǎn)位于蛋白L N端的五個(gè)小的同源結(jié)構(gòu)域,。這些結(jié)構(gòu)域的三維結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)G結(jié)構(gòu)域非常相似，盡管蛋白質(zhì)G和L沒(méi)有顯著的序列同源性,。

 

蛋白L能夠結(jié)合IgG,、IgM、IgA,、IgE和IgD,，還可以結(jié)合單鏈抗體ScFv和Fab。與蛋白A和蛋白G相比,，蛋白L更能廣泛地結(jié)合各種來(lái)源及亞類(lèi)的抗體,，包括人、小鼠,、大鼠,、兔和雞，但不結(jié)合牛,、山羊或綿羊來(lái)源的免疫球蛋白,。

 

賽爾瑞成開(kāi)發(fā)的重組蛋白L，既保留了與抗體κ鏈結(jié)合的特性,，同時(shí)也不會(huì)影響抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn),。

 

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