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產(chǎn)品介紹

BCA（Bicinchoninic acid）法是目前應(yīng)用比較廣泛的蛋白質(zhì)濃度測(cè)定方法,?；陔p縮脲反應(yīng)，即在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)將Cu2+還原成Cu+,，產(chǎn)生一種紫藍(lán)色復(fù)合物,，在562nm處有高的吸光值，該反應(yīng)產(chǎn)物的量與蛋白質(zhì)濃度成正比,。BCA蛋白濃度測(cè)定法實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)濃度測(cè)定的簡(jiǎn)便,、靈敏、快速和穩(wěn)定性。試劑盒中提供的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品為用戶制作標(biāo)準(zhǔn)曲線提供了便利,。該BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒可用于比色皿法檢測(cè),，也可用于微孔板法檢測(cè)。前者雖需較大量（100μL）的蛋白樣品,，但由于其在檢測(cè)中使用蛋白樣品與BCA工作液的比率為1:20（v/v）,，從而降低干擾物質(zhì)帶來的影響。后者操作簡(jiǎn)單方便,，僅需少量（10-25μL）的蛋白樣品,。不過，由于其在檢測(cè)中使用蛋白樣品與BCA工作液的比率為1:8（v/v）,，某種程度上限制干擾物質(zhì)的承受濃度以及降低最低檢測(cè)水平,。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1）靈敏度高，最小檢測(cè)蛋白量可達(dá)0.2μg,，檢測(cè)濃度下限達(dá)到10μg/mL(在20~1000μg/ml 濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系）,。

2）速度快，比一般的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒顯色所用時(shí)間短,。比傳統(tǒng)的Lowry法檢測(cè)速度約快4倍,。

3）線性范圍廣，20-1000μg/mL濃度范圍內(nèi)有較好的線性范圍,。

4)  不受大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響, BCA法測(cè)定蛋白濃度的最大優(yōu)點(diǎn)是蛋白濃度的測(cè)定可以耐受高濃度的去垢劑, 可以兼容樣品中高達(dá) 5%的SDS; 5%的Triton X- 100; 5%的Tween 20, 60, 80,。但受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保EDTA低于 10mM ,，無EGTA ,，二硫蘇糖醇低于 1mM; β-巰基乙醇低于 0.01%。

注意事項(xiàng)

1）BCA蛋白測(cè)定法測(cè)定時(shí)顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深,，顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān),，需注意保持定時(shí)和定溫，以確保精確定量,。

2）長(zhǎng)期保存,，若發(fā)現(xiàn)BCA試劑A或者試劑B有沉淀發(fā)生。請(qǐng)37ºC溫育并伴隨攪拌促使其充分溶解,。如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染,，則應(yīng)丟棄。

3）實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范,，提高上樣量的精確度,。

4）每次測(cè)定都需做相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，因?yàn)轱@色反應(yīng)與溫度和時(shí)間的變化有關(guān),，精準(zhǔn)蛋白定量宜每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線,。