1、常規(guī)的細(xì)胞凍存主要采用DMSO+血清的方式，賽爾瑞成進(jìn)行凍存液的無血清、低（無）DMSO、無蛋白這些方向持續(xù)開發(fā)的原因是什么？
細(xì)胞凍存液的研發(fā)歷史可以追溯到20世紀(jì)中期，隨著細(xì)胞生物學(xué)和低溫生物學(xué)的發(fā)展，凍存液逐漸優(yōu)化和改進(jìn)。20世紀(jì)60年代，DMSO成為常用冷凍保護(hù)劑，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凍存。隨后，凍存液中開始添加胎牛血清（FBS）等成分，提供營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)。20世紀(jì)80年代，科學(xué)家優(yōu)化凍存液配方，調(diào)整DMSO和血清濃度，減少毒性并提高凍存效果。
DMSO作為常用的冷凍保護(hù)劑，在較高濃度或長(zhǎng)時(shí)間暴露下會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性，影響細(xì)胞活力和功能。因此降低其濃度或?qū)ふ姨娲肥潜匾摹?br />
血清因其成分復(fù)雜、存在批次差異、成分不明確、存在病原體污染風(fēng)險(xiǎn)等原因，應(yīng)用無血清凍存液已成為細(xì)胞凍存領(lǐng)域主流。
蛋白在凍存液中的添加可能為后續(xù)實(shí)驗(yàn)和監(jiān)管引入不可控的變量，且高質(zhì)量蛋白成本高，往往會(huì)提高凍存液的成本。
賽爾瑞成自2018年推出第一款經(jīng)典的無血清細(xì)胞凍存液以來，CRD系列無血清細(xì)胞凍存液因其過硬且穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量，獲得了國(guó)內(nèi)數(shù)百家實(shí)驗(yàn)室和企業(yè)用戶的認(rèn)可，廣泛服務(wù)于國(guó)內(nèi)細(xì)胞生物學(xué)研究和應(yīng)用。
2、應(yīng)用CRD系列凍存液進(jìn)行細(xì)胞凍存前需要注意什么？
由于各類動(dòng)物細(xì)胞株（系）通常都比較脆弱，對(duì)所處的環(huán)境要求較高，而細(xì)胞凍存是讓人工干預(yù)，強(qiáng)行讓細(xì)胞處于一種缺營(yíng)養(yǎng)的“冬眠”狀態(tài)，所以凍存之前的細(xì)胞狀態(tài)對(duì)凍存的效果非常關(guān)鍵，建議凍存之前，務(wù)必讓細(xì)胞處于良好的對(duì)數(shù)期狀態(tài)，凍存之前細(xì)胞存活率應(yīng)接近或達(dá)到100%。對(duì)于貼壁細(xì)胞，凍存之前，胰酶消化要適度，吹散和重懸動(dòng)作要適當(dāng)，以免損傷細(xì)胞狀態(tài)。過度消化或未輕柔吹打和重懸的細(xì)胞由于狀況較差，通常不宜再冷凍保存。觀察凍存前的細(xì)胞狀態(tài)應(yīng)該在消化重懸完成后進(jìn)行，以確認(rèn)凍存時(shí)的細(xì)胞狀態(tài)良好。
3、應(yīng)用賽爾瑞成的CRD系列無血清細(xì)胞凍存液發(fā)現(xiàn)有的細(xì)胞凍存效果不好？有什么建議？
CRD系列無血清細(xì)胞凍存液主要依據(jù)成分的差異進(jìn)行產(chǎn)品命名，均為通用型細(xì)胞凍存液，經(jīng)過廣泛測(cè)試驗(yàn)證，適用于絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物（包括人）原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞系以及雜交瘤細(xì)胞的凍存等。
因?yàn)榧?xì)胞來源各異、種類繁多，并且新的細(xì)胞株（系）不停的涌現(xiàn)，甚至許多細(xì)胞都是經(jīng)過工程化改造的細(xì)胞系，我們無法對(duì)市場(chǎng)上所有細(xì)胞株（系）進(jìn)行全面驗(yàn)證。因此，對(duì)于某些較為珍貴的細(xì)胞，建議用戶先進(jìn)行短期（如一周以內(nèi)）凍存效果預(yù)實(shí)驗(yàn)，或者同時(shí)使用傳統(tǒng)含血清的常規(guī)凍存液進(jìn)行對(duì)比測(cè)試，確認(rèn)無誤后再進(jìn)行正式批量?jī)龃妗?/span>
4、凍存液瓶底出現(xiàn)沉淀，是不是產(chǎn)品質(zhì)量出現(xiàn)問題？
凍存液中沉淀的出現(xiàn)一般存在如下三種情況：
（1）溶液配置、過濾分裝過程中，異物的帶入。賽爾瑞成的無血清細(xì)胞凍存液的生產(chǎn)過程均嚴(yán)格按照GMP體系進(jìn)行管理，尤其在產(chǎn)品質(zhì)檢和出庫(kù)前會(huì)進(jìn)行雙重質(zhì)檢，在外觀上能夠杜絕此類現(xiàn)象的發(fā)生。這種情況，在我們的產(chǎn)品中罕見發(fā)生。
（2）溶液染菌。賽爾瑞成無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)過程中有一個(gè)非常重要的步驟是用0.22μm孔徑濾膜進(jìn)行除菌過濾，且整個(gè)操作過程是在百級(jí)的環(huán)境中進(jìn)行操作。此外，我們會(huì)對(duì)每批終產(chǎn)品出廠前進(jìn)行無菌檢測(cè)，確保終產(chǎn)品沒有染菌。
為避免客戶在使用凍存液時(shí)，產(chǎn)生細(xì)菌污染，建議如下：
①在超凈工作臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作，同時(shí)使用無菌的移液器、吸頭和容器，操作前后用75%乙醇或消毒劑清潔雙手。
②根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，可以將大包裝凍存液分裝成小份進(jìn)行保存，減少反復(fù)開啟瓶蓋帶來的污染風(fēng)險(xiǎn)；
（3）鹽溶液析出
為保證達(dá)到更優(yōu)的保護(hù)效果，CRD系列無血清細(xì)胞凍存液含有維持細(xì)胞狀態(tài)良好的復(fù)合鹽離子成分，因此，在低溫保存一段時(shí)間后，瓶底可能會(huì)出現(xiàn)少量飽和析出的固體鹽沉淀，經(jīng)嚴(yán)格測(cè)試，對(duì)細(xì)胞凍存保護(hù)效果無任何不利影響，此時(shí)只需取用上清，正常使用即可，或者離心去除沉淀或者用過濾器（0.22μm孔徑濾膜）過濾去除少許沉淀。一般飽和析出不會(huì)發(fā)生第二次。
若您在使用賽爾瑞成CRD系列無血清細(xì)胞凍存液過程中遇到任何問題，歡迎隨時(shí)與我們聯(lián)系。
