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賽爾瑞成工具試劑專欄(七):TOPO克隆試劑盒、無縫克隆和Gateway系統(tǒng)
發(fā)布時(shí)間:2025/5/14 9:12:29   點(diǎn)擊次數(shù):39次

 

一、TOPO克隆試劑盒

 

產(chǎn)品介紹
本制品和傳統(tǒng)的T4連接酶原理不同,它利用了Topoisomerase可以在瞬間(幾秒鐘-幾分鐘)、高效(接近100%)連接DNA片段的原理采用本公司獨(dú)創(chuàng)的工藝制成。

 

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 可以在瞬間(幾秒鐘-幾分鐘)完成連接。
2. 無需冰浴和熱休克,室溫5分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)化;無需1小時(shí)復(fù)蘇,只需37?C 10分鐘復(fù)蘇便可以涂板。從連接到涂板只需15-20分鐘。
3. 無自連、零背景,無需繁瑣藍(lán)白斑篩選,見到長出的克隆便是有插入的(接近100%)。
4. 測(cè)序可以采用 M13F/M13R通用引物測(cè)序

 

訂購信息

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

目錄價(jià)格

 CN6101 

TA末端TOPO克隆試劑盒

20T

450

CN6102

4x20T

1450

CN6201 

平末端TOPO克隆試劑盒

20T

450

CN6202

4x20T

1450


二、一步法無縫單/多片段克隆mix

 

產(chǎn)品介紹
本產(chǎn)品不依賴于T4 DNA連接酶,不受載體和目的片段的酶切位點(diǎn)限制,而直接用重疊片段重組的方法,采用特殊的酶組合可以將任意方法線性化后的載體和與其兩端具有15-25bp重疊區(qū)域的PCR片段定向重組,可以快速實(shí)現(xiàn)1-5個(gè)片段的高效無縫克隆。本產(chǎn)品采用5x高濃縮形式,使得反應(yīng)體系中能加入更多的目的片段,從而提高連接效率,特別適合一些高難度的連接反應(yīng)。

 

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 30分鐘可以將一個(gè)或者多個(gè)長、短PCR擴(kuò)增片段(平末端或者A粘性末端)插入載體。
2. 不受載體和插入片段酶切位點(diǎn)的可用性和平端/粘性末端的限制,可以在任意位點(diǎn)進(jìn)行克隆。
3. 無縫克隆,插入點(diǎn)不會(huì)引入不需要的堿基序列。
4. 高效、準(zhǔn)確,陽性率>95% 。

 

訂購信息

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

目錄價(jià)格

 CN6301 

一步法無縫單/多片段克隆mix

10T(20ul)

450

CN6302

4x10T(20ul)

1300

 

三、Gateway克隆-Gateway LR Clone Kit
 

產(chǎn)品介紹
Gateway克隆系列產(chǎn)品是一種嶄新的高通量基因克隆技術(shù),可以簡單高效地把入門載體 (The EntryClone) 克隆到多種目的載體 (Destination vector) 中。Gateway 克隆技術(shù)無需依賴限制性內(nèi)切酶和連接酶的傳統(tǒng)克隆技術(shù),而是利用天然的 λ 噬菌體與大腸桿菌 (E. coli) 的染色體之間產(chǎn)生的位點(diǎn) (att)特異性的重組整合,使 DNA 片段在不同的克隆載體之間實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)移。Gateway 克隆重組技術(shù)具有可靠的穩(wěn)定性,當(dāng)基因在重組目的表達(dá)載體之間快速簡便地穿梭時(shí),可以保證基因以正確的方向插入并保持閱讀框架不發(fā)生改變。Gateway LR Clone Kit 可以將所選基因克隆到多種表達(dá)目的載體中。此 LR Clone Enzyme 與基因文庫里的各種人、小鼠和大鼠的 ORF 載體相兼容。Gateway 克隆體系在細(xì)菌轉(zhuǎn)化這個(gè)環(huán)節(jié)使用正向篩選(抗生素)和負(fù)向篩選(ccdB 致死基因)兩種篩選,以確保得到高比例的陽性重組。

 

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 靈活便捷:易于把基因克隆到帶有不同啟動(dòng)子和標(biāo)記的多種載體。
2. 方便快速:最大化縮短實(shí)驗(yàn)前計(jì)劃時(shí)間,無需限制性內(nèi)切酶和連接酶。
3. 準(zhǔn)確無誤:基因以正確的方向插入并保持閱讀框架不發(fā)生改變。
4. 無需測(cè)序:一旦入門載體 (The Entry Clone) 被建立,就可以使用 Gateway 克隆系統(tǒng)克隆至任意Gateway 目的載體 (Destination vector) ,無需擔(dān)心引入突變。

 

訂購信息

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

目錄價(jià)格

 CN6401 

Gateway LR Clone Kit

20T

1900

CN6402

4x20T

6500

 

 

賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司專業(yè)提供重組蛋白定制服務(wù)和細(xì)胞生物學(xué)試劑系列產(chǎn)品。

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