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賽爾瑞成工具試劑專欄(八):RT-PCR反轉(zhuǎn)錄及qPCR熒光定量系列
發(fā)布時間:2025/5/14 9:21:35   點擊次數(shù):42次

 

一、RT-PCR反轉(zhuǎn)錄

 

反轉(zhuǎn)錄試劑盒I(含gDNA去除劑)

 

產(chǎn)品介紹
本試劑盒將去除基因組DNA(gDNA)酶和buffer進(jìn)行了一管化處理,專為兩步法 RT-PCR 第一步實驗設(shè)計的超高靈敏度 RT-PCR 反應(yīng)系統(tǒng),可以從極低量的總 RNA 或 poly(A) mRNA 合成第一鏈 cDNA,并能夠通讀 GC 含量高、二級結(jié)構(gòu)復(fù)雜的RNA 模板。通常通過柱純化的RNA經(jīng)常混入微量的gDNA,當(dāng)檢測目的基因中存在假基因或者無法橫跨內(nèi)含子設(shè)計引物時,混入的gDNA會被當(dāng)成模板擴(kuò)增,影響數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。本試劑盒增加了具有強(qiáng)力降解DNA的gDNA清除劑,通過該組分將混入RNA的gDNA降解,無需純化即可對RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。另外,本產(chǎn)品將引物配比、反轉(zhuǎn)錄酶和RNase抑制劑優(yōu)化成mix形式,精簡了試劑盒組成,非常簡便操作,而且對后續(xù)Realtime PCR反應(yīng)體系影響也降到最低。


產(chǎn)品特點
1. 去除gDNA:只需2分鐘,就可以實現(xiàn)去除基因組DNA污染。
2. 方便快捷:mix配制,組分更少,操作更快;逆轉(zhuǎn)錄只需15min就可以完成。
3. 超強(qiáng)對后續(xù)qPCR反應(yīng)適用性:通過組分和Buffer優(yōu)化,使帶入到后續(xù)qPCR反應(yīng)的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液的影響降到最低。
4. 高靈敏度:對極少量的RNA模板也可以進(jìn)行良好的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。


訂購信息

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

目錄價格

CN5101 

反轉(zhuǎn)錄試劑盒I(含gDNA去除劑)

100T(20ul體系)

690

 

反轉(zhuǎn)錄試劑盒II(含gDNA去除劑)


產(chǎn)品介紹
本產(chǎn)品是在反轉(zhuǎn)錄試劑盒I基礎(chǔ)上采用了最新研制的耐高溫(>50?C),極速擴(kuò)增的反轉(zhuǎn)錄酶,專為兩步法 RT-PCR 第一步實驗設(shè)計的超高靈敏度 RT-PCR 反應(yīng)系統(tǒng),可以從極低量(pg級到ug級)的總 RNA 或 poly(A) mRNA 合成第一鏈 cDNA,并能夠通讀 GC 含量高、二級結(jié)構(gòu)復(fù)雜的 RNA 模板。通常通過柱純化的RNA經(jīng)常混入微量的gDNA,當(dāng)檢測目的基因中存在假基因或者無法橫跨內(nèi)含子設(shè)計引物時,混入的gDNA會被當(dāng)成模板擴(kuò)增,影響數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。本試劑盒增加了具有強(qiáng)力降解DNA的gDNA清除劑,通過該組分將混入RNA的gDNA降解,無需純化即可對RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。另外,本產(chǎn)品將引物配比、反轉(zhuǎn)錄酶和RNase抑制劑優(yōu)化成mix形式,精簡了試劑盒組成,非常簡便操作,而且對后續(xù)Realtime PCR反應(yīng)體系影響也降到最低。


產(chǎn)品特點
1. 去除gDNA:只需2分鐘,就可以實現(xiàn)去除基因組DNA污染。
2. 方便快捷:mix配制,組分更少,操作更快;逆轉(zhuǎn)錄只需5min就可以完成。
3. 超強(qiáng)對后續(xù)qPCR反應(yīng)適用性:通過組分和Buffer優(yōu)化,使帶入到后續(xù)qPCR反應(yīng)的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液的影響降到最低。
4. 高靈敏度:對極少量的RNA模板也可以進(jìn)行良好的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。


訂購信息

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

目錄價格

CN5201 

反轉(zhuǎn)錄試劑盒II(含gDNA去除劑)

100T(20ul體系)

730

 

二、qPCR熒光定量


2X SYBRgreen Realtime PCR mix


產(chǎn)品介紹
本產(chǎn)品是采用SYBR Green I嵌合熒光法進(jìn)行實時熒光定量PCR的專用2×濃度預(yù)混液。利用HotStart Taq DNA Polymerase高溫加熱前,anti-Taq單克隆抗體與Taq酶結(jié)合,抑制Taq酶的聚合酶活性,從而抑制在低溫條件下出現(xiàn)的由引物和模板DNA非特異性雜交或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增。Anti-Taq單克隆抗體在PCR反應(yīng)第一循環(huán)的變性步驟中已完全失活,不會阻礙之后的Taq Polymerase反應(yīng),大大提高了PCR反應(yīng)的靈敏度及特異性。優(yōu)化濃度的SYBR Green I 熒光染料,特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,熒光信號增強(qiáng),而不摻入鏈中SYBR Green I染料分子熒光信號不變,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步,熒光可以在退火或延伸階段測定。


訂購信息

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

目錄價格

CN5301 

2X SYBRgreen Realtime PCR mix

5x1ml

600

CN5302

(5x1ml)×10

4800

 

2X SYBR Premix EsTaq (with Tli RNaseH)


產(chǎn)品介紹
本品采用Sybrgreen嵌合熒光法進(jìn)行熒光定量的專用試劑。制品中含有熒光定量反應(yīng)的最適濃度Sybrgreen,是一種2×濃度的預(yù)混試劑,進(jìn)行實驗時,PCR反應(yīng)液的配制十分方便簡單。制品中使用了antiTaq抗體的Hot Start法用DNA聚合酶,與熒光定量反應(yīng)適合Buffer組合,可以有效抑制非特異性的PCR擴(kuò)增,大大提高PCR的擴(kuò)增效率,可以進(jìn)行高靈敏度的熒光定量擴(kuò)增反應(yīng)。另外,本品中添加了Tli RNaseH (耐熱性RNaseH),以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)時,可以很好地抑制由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應(yīng)造成的阻害作用。適合于快速熒光定量擴(kuò)增反應(yīng),可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量、檢測,重復(fù)性好,可信度高。


訂購信息

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

目錄價格

CN5401 

2X SYBR Premix EsTaq (with Tli RNaseH)

5ml(50ul反應(yīng)×200次)

600

CN5402

10ml(50ul反應(yīng)×400次)

1050

 

 

賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司專業(yè)提供重組蛋白定制服務(wù)和細(xì)胞生物學(xué)試劑系列產(chǎn)品。

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