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Technical Support無血清細(xì)胞凍存液對(duì)比含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)
發(fā)布時(shí)間：2019/3/28 14:23:11 點(diǎn)擊次數(shù)：4591次
細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長(zhǎng)期保存的常用方法，其中細(xì)胞凍存液，作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液，不僅僅是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存，在細(xì)胞的購買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用，因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。
如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等，從而引起細(xì)胞死亡。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護(hù)劑，在凍存細(xì)胞時(shí)將細(xì)胞懸浮于凍存液中，可使冰點(diǎn)降低，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞，可以防止或減少冷凍冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷作用。這樣就使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，在需要時(shí)直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細(xì)胞活性。
傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液。
含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜），最后才移至液氮罐中進(jìn)行長(zhǎng)期的儲(chǔ)存。
（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個(gè)小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量的死亡。）
（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個(gè)小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量的死亡。）
可見，含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問題：
1. 凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液，此步可省略)
2. 需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步驟繁瑣，耗時(shí)耗力
3. 含血清，細(xì)胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高
4. 血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異
5. 需液氮凍存，且不能原位（如孔板）凍存
2. 需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步驟繁瑣，耗時(shí)耗力
3. 含血清，細(xì)胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高
4. 血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異
5. 需液氮凍存，且不能原位（如孔板）凍存
Cellregen無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分，含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。
Cellregen無血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是：將細(xì)胞凍存懸液（凍存管或孔板）直接放置-80℃冰箱長(zhǎng)期保存。
可見，Cellregen無血清細(xì)胞凍存液相對(duì)于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)有：
1. 即用型，無需現(xiàn)配，直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可
2. 通用型，適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞
3. 無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡(jiǎn)單
4. 不含血清，大大減少細(xì)胞污染
5. 因不含血清，批次間差異小
6. 無需液氮，-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存
7. 可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過程
2. 通用型，適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞
3. 無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡(jiǎn)單
4. 不含血清，大大減少細(xì)胞污染
5. 因不含血清，批次間差異小
6. 無需液氮，-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存
7. 可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過程
