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Fibronectin簡介

重組人纖維連接蛋白片段（Recombinant human fibronectin fragment，以下簡稱Fibronectin（CH-296））為一段人工重組蛋白,，由574個氨基酸組成,，分子量約為63kDa。
 

Fibronectin（CH-296）包括三個功能區(qū) ：

[1] C-Domain：細(xì)胞粘附區(qū)域,，含RGD序列,，又稱細(xì)胞結(jié)合域（central cell-binding domain）
[2] H-Domain：提供病毒粘附，又稱肝磷脂結(jié)合域（heparin-binding domain）
[3] CS-1位點(diǎn)：提供細(xì)胞粘附功能

Fibronectin（CH-296）結(jié)構(gòu)如下圖所示
 

Fibronectin應(yīng)用

1. 提高逆轉(zhuǎn)錄病毒,、慢病毒的轉(zhuǎn)染效率

作用原理如下：
細(xì)胞表面VLA-4及VLA-5可分別與Fibronectin（CH-296）上的CS-1 位點(diǎn)及C-Domain結(jié)合，逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以與H -Domain結(jié)合,。在經(jīng)Fibronectin（CH-296）包被的培養(yǎng)容器表面,，細(xì)胞與病毒載體以高濃度共存，從而顯著提高病毒的轉(zhuǎn)染效率30～70%,。

 

2. 促進(jìn)細(xì)胞黏連粘附及刺激細(xì)胞增殖
細(xì)胞的黏連是機(jī)體結(jié)構(gòu)得以維持,、細(xì)胞生長完成的必要條件，研究結(jié)果表明：Fibronectin（CH-296）作為細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)，可以促進(jìn)細(xì)胞的黏連生長,，使多種細(xì)胞的貼壁率達(dá)到90%以上（對照組為10%）,，細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)良好，細(xì)胞的代謝率增強(qiáng),，DNA,、RNA及蛋白質(zhì)合成速度提高約5倍，細(xì)胞的集落率升高幾倍,，原代培養(yǎng)的成活率明顯提高,，細(xì)胞生長時間縮短。

同時,，F(xiàn)ibronectin（CH-296）能刺激細(xì)胞上千倍的增殖,。作用原理是： Fibronectin（CH-296）和抗CD3抗體可分別與T淋巴細(xì)胞上的VLA和TCR結(jié)合， 兩者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,，通過Ras途徑刺激T細(xì)胞的增殖和分化,，使其獲得上千倍的增殖。
 

3. 其它應(yīng)用
研究還證明,，F(xiàn)ibronectin能提高細(xì)胞的融合率,，縮短融合周期，可應(yīng)用于許多科研中,，如應(yīng)用于細(xì)胞雜交瘤技術(shù)等,。將Fibronectin涂到微球載體上作為細(xì)胞大量生產(chǎn)的介質(zhì)，可以節(jié)省空間,，節(jié)省原材料,，成為應(yīng)用培養(yǎng)細(xì)胞技術(shù)來生產(chǎn)新藥品的基礎(chǔ)物質(zhì)。
 

賽爾瑞成提供高品質(zhì)重組人Fibronectin（CH-296）,，是在符合GMP標(biāo)準(zhǔn)要求的潔凈間由原核系統(tǒng)表達(dá),、經(jīng)分離純化和過濾除菌等步驟制成 ，分子量約為63.0 kDa,。該產(chǎn)品具有高純度,，高活性，低內(nèi)毒素的特點(diǎn) ,，并通過 ISO9001,、ISO13485質(zhì)量體系雙重認(rèn)證。
 

重組人Fibronectin（CH-296）產(chǎn)品特點(diǎn)
1,、純化自重組  E.coli 菌株,，其中攜帶有編碼人纖維連接蛋白片段的質(zhì)粒 
2、無血清無動物來源
3,、內(nèi)毒素水平：<1 EU/μg
4,、純度：經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測純度>95% 

生物學(xué)活性： 在促進(jìn)小鼠3T3細(xì)胞的粘附和增殖實驗中,，我公司生產(chǎn)的重組人Fibronectin（CH-296）表現(xiàn)出較好的促增值活性，結(jié)果如下圖所示：