大腸桿菌表達系統(tǒng)是使用很廣泛的蛋白質(zhì)表達系統(tǒng),，擁有遺傳背景清楚,、表達水平高,、操作簡單、培養(yǎng)周期短等優(yōu)點,，市售的大約30%的重組蛋白產(chǎn)品都是由大腸桿菌系統(tǒng)生產(chǎn)而來。
應(yīng)用大腸桿菌表達系統(tǒng)時，為了得到符合科研和產(chǎn)業(yè)需求的重組蛋白目標產(chǎn)物，往往需要進行目標蛋白基因或菌種的突變,，進行大量且繁瑣的表達菌種和高表達蛋白突變體的篩選工作。大腸桿菌作為宿主菌,，表達的蛋白定位為胞內(nèi),、胞外和周質(zhì)腔三種。為獲得胞內(nèi)蛋白或周質(zhì)腔蛋白,，往往需要對大腸桿菌進行破碎,。雖然胞外蛋白可以借助信號肽的引導(dǎo)分泌到胞外,，但蛋白的分泌效率通常不高,，且很多時候，發(fā)酵中后期目標蛋白才開始運輸?shù)桨?，?dǎo)致絕大多數(shù)蛋白仍儲存在胞內(nèi),，所以在進行蛋白制備時，為提高蛋白收率,，仍需要進行細胞破碎,。因此，破碎細胞是高通量篩選大腸桿菌菌種時必不可少的環(huán)節(jié),。
目前常用的破碎細胞的方法有超聲,、均質(zhì)機壓力、溶菌酶,、反復(fù)冷凍,、化學(xué)試劑等，但是這些方法不同程度存在破碎效率低,、成本高,、周期長、細胞破碎不均一等的缺點,。賽爾瑞成開發(fā)的大腸桿菌專用破菌液,，能夠高效、簡便的對大腸桿菌進行細胞破碎,，特別適用于需要細胞破碎的高通量篩選,。
★ 產(chǎn)品優(yōu)勢
1. 原位破菌，使用便捷,，篩選成本更低
原位收集菌體,，原位破菌，高通量操作。適用于各種型號培養(yǎng)板（如96孔板,、48孔板,、6孔板等），節(jié)省儀器成本,、人力成本,，節(jié)約時間，方便操作,。
2. 組成成分溫和
不含還原劑,、強變性劑、離子型去污劑等烈性成分,，對絕大多數(shù)蛋白結(jié)構(gòu)和活性無影響,。
★ 使用方法
1. 按常規(guī)方法，在培養(yǎng)板（如96孔板,、48孔板,、24孔板等）中接種培養(yǎng)大腸桿菌，至蛋白表達完成,，即可使用孔板離心機離心收菌,，棄去上清，盡量去除干凈,；
2. 只需將孔板中收集的菌體按照孔板體積的五分之一左右加入破菌液,，簡單混勻，置于-20°C以下冰箱,，待完全冷凍結(jié)實,。需要破菌時取出室溫自然解凍充分，然后按常規(guī)方法高速冷凍離心,，收取破菌上清和菌體沉淀,。
